0861殘留溶劑測定法

藥品中的殘留溶劑系指在原料藥或輔料的生產(chǎn)中,以及在制劑制備過程中使用的，但在工藝過程中未能完全去除的有機(jī)溶劑。藥品中常見的殘留溶劑及限度見附表1,除另有規(guī)定外,第一、第二、第三類溶劑的殘留限度應(yīng)符合附表1中的規(guī)定;對其他溶劑，應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)工藝的特點(diǎn),制定相應(yīng)的限度，使其符合產(chǎn)品規(guī)范、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)或其他基本的質(zhì)量要求。本法照氣相色譜法(通則0521)測定。

色譜柱

1.毛細(xì)管柱

除另有規(guī)定外，極性相近的同類色譜柱之間可以互換使用。

(1)非極性色譜柱 固定液為100%的二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱

(2)極性色譜柱 固定液為聚乙二醇(PEG-20M)的毛細(xì)管柱,

(3)中極性色譜柱固定液為(35%)二苯基-(65%)甲基聚硅氧烷、(50%)二苯基-(50%)二甲基聚硅氧烷、(35%)二苯基-(65%)二甲基聚硅氧烷、(14%)氰丙基苯基-(86%)二甲基聚硅氧烷、(6%)氰丙基苯基-(94%)二甲基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱等。

(4)弱極性色譜柱 固定液為(5%)苯基-(95%)甲基聚硅氧烷、(5%)二苯基-(95%)二甲基硅氧烷共聚物的毛細(xì)管柱等。

2. 填充柱

以直徑為0.18~0.25mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他適宜的填料作為固定相系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

(1)用待測物的色譜峰計(jì)算,毛細(xì)管色譜柱的理論板數(shù)一股不低于5000;填充柱的理論板數(shù)一股不低于1000.

(2)色譜圖中，待測物色譜峰與其相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5.

(3)以內(nèi)標(biāo)法測定時，對照品涪液連續(xù)進(jìn)樣5次，所得待測物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的相對標(biāo)準(zhǔn)差(RSD)應(yīng)不大于5%;若以外標(biāo)法測定，所得待測物峰面積的RSD應(yīng)不大于10%。

供試品溶液的制備

1.頂空進(jìn)樣

除另有規(guī)定外，精密稱取供試品0.1~1g:通常以水為溶劑;對于非水溶性藥物,可采用N，從二甲基甲酰胺、二甲基亞砜或其他適宣溶劑;根據(jù)供試品和待測溶劑的溶解度，選擇適宜的溶劑且應(yīng)不干擾待測溶劑的測定。根據(jù)各品種項(xiàng)下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液,其濃度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測定的需要。

2.溶液直接進(jìn)樣

清密稱取供試品適量，用水或合適的有機(jī)溶劑使溶解:根據(jù)各品種項(xiàng)下殘留溶劑的限度規(guī)定配制供試品溶液，其濃度應(yīng)滿足系統(tǒng)定量測定的需要對照品溶液的制備

精密:稱取各品種項(xiàng)下規(guī)定檢查的有機(jī)溶劑適量，采用與制備供試品溶液相同的方法和溶劑制備對照品浴液;如用水作溶劑，一般應(yīng)先將待測有機(jī)溶劑溶解在50%二甲基亞砜或N，從二甲基甲酰胺溶液中，再用水逐步稀釋。若為限度檢查，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定確定對照品溶液的濃度;若為定量測定，為保證定量結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)根據(jù)供試品中殘留濟(jì)劑的實(shí)際殘留量確定對照品溶液的濃度;通常對照品溶波色道峰面積不宣超過供試品溶液中對應(yīng)的殘留溶劑色譜峰面積的2倍，同時應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整，并確保濃度在方法學(xué)驗(yàn)證的有效范圍內(nèi)。必要時，應(yīng)重新調(diào)整供試品溶液或?qū)φ掌啡軡獾臐舛取?/span>

測定法

第一法(毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣等溫法)

色潽條件 桂溫一般為40~100℃:常以氨氣為載氣,流速為每分鐘1.0~2.0m(一般適用于內(nèi)徑為0.32mm或0.25mm類的色譜注):以水為溶劑時頂空瓶平衡溫度為70~85℃，頂空瓶平衡時間通常為30~60分鐘;進(jìn)樣口溫度為200℃;如采用火焰離子化檢測器(FID),溫度為250℃。測定法 取對照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于2次，測定待測峰的峰面積。

第二法(毛細(xì)管柱頂空進(jìn)樣程序升溫法)

色潽條件 柱溫一般先在40℃維持8分鐘，再以每分鐘8℃的升溫速率升至120℃,維持10分鐘:以氨氣為載氣,流速為每分鐘2.0m;以水為溶劑時頂空瓶平衡溫度為70~85℃，頂空瓶平衡時間通常為30~60分鐘;進(jìn)樣口溫度為200℃;如采用FID檢測器,進(jìn)樣口溫度為250℃

具體到某個品種的殘留溶劑檢查時，可根據(jù)該品種項(xiàng)下殘留溶劑的組成調(diào)整升溫程序測定法取對照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣不少于2次，測定待測峰的峰面積。

測定法 取對照品溶液和供試品溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣2~3次，測定待測峰的峰面積

計(jì)算法

(1)限度檢查 除另有規(guī)定外，按各品種項(xiàng)下規(guī)定的供試品液濃度測定。以內(nèi)標(biāo)法測定時，供試品溶液所得被測溶劑峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積之比不得大于對照品溶液的相應(yīng)比值。以外標(biāo)法測定時，供試品溶液所得被測溶劑峰面積不得大于對照品溶液的相應(yīng)峰面積。

(2)定量測定按內(nèi)標(biāo)法或外標(biāo)法計(jì)算各殘留溶劑的量

【附注】(1)當(dāng)需要檢查有機(jī)溶劑的數(shù)量不多,且極性差異較小時，可采用等溫法。當(dāng)需要檢查的有機(jī)溶劑數(shù)量較多，且極性差異較大時,可采用程序升溫法。

(2)除另有規(guī)定外，頂空條件的選擇:

①應(yīng)根據(jù)供試品中殘留溶劑的沸點(diǎn)選擇頂空平衡溫度。對沸點(diǎn)較高的殘留溶劑，通常選擇較高的平衡溫度;但此時應(yīng)兼顧供試品的熱分解特性,盡量避免供試品產(chǎn)生的揮發(fā)性熱分解產(chǎn)物對測定的干擾

②頂空平衡時間一般為30~45分鐘，以保證供試品溶液的氣-波兩相有足夠的時間達(dá)到平衡，頂空平衡時間通常不宜過長，如超過60分鐘,可能引起頂空瓶的氣密性變差，導(dǎo)致定量準(zhǔn)確性的降低。

③對照品溶液與供試品溶液必須使用相同的頂空條件

(3)定量方法的驗(yàn)證當(dāng)采用頂空進(jìn)樣時,供試品與對照品處于不完全相同的基質(zhì)中，故應(yīng)考慮氣液平衡過程中的基質(zhì)效應(yīng)(供試品溶液與對照品溶液組成差異對頂空氣-波平衡的影響)。由于標(biāo)準(zhǔn)加入法可以消除供試品溶液基質(zhì)與對照品溶液基質(zhì)不同所致的基質(zhì)效應(yīng)的影響，故通常采用標(biāo)準(zhǔn)加)法驗(yàn)證定量方法的準(zhǔn)確性;當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)加入法與其他定量方法的結(jié)果不一致時，應(yīng)以標(biāo)準(zhǔn)加入法的結(jié)果為準(zhǔn)

(4)干擾峰的排除供試品中的未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物易對殘留溶劑的測定產(chǎn)生干擾。干擾作用包括在測定的色譜系統(tǒng)中未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物與待測物的保留值相同(共出峰);或熱,降解產(chǎn)物與待測物的結(jié)構(gòu)相同(如甲氧基熱:裂解產(chǎn)生甲醇)。當(dāng)測定的殘留溶劑超出限度，但未能確定供試品中是否有末知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物對測定有干擾作用時，應(yīng)通過試驗(yàn)排除干擾作用的存在。對第一類干擾作用,通常采用在另一種極性不同的色譜往系統(tǒng)中對相同供試品再進(jìn)行測定，比較不同色譜系統(tǒng)中測定結(jié)果的方法。如兩者結(jié)果一致，則可以排除測定中有共出峰的干擾;如兩者結(jié)果不一致，則表明測定中有共出峰的干擾。對第二類干擾作用，通常要通過測定已知不含該溶劑的對照樣品來加以判斷。

(5)含氮堿性化合物的測定普通氣相色譜儀中的不銹鋼管路、進(jìn)樣器的襯管等對有機(jī)胺等含氮堿性化合物具有較強(qiáng)的吸附作用，致使其檢出靈敏度降低，應(yīng)采用惰性的硅鋼材料或鎳鋼材料管路:采用溶波直接進(jìn)樣法測定時，供試品溶液應(yīng)不呈酸性，以免待測物與酸反應(yīng)后不易汽化。

通常采用弱極性的色譜柱或其填料預(yù)先經(jīng)堿處理過的色譜柱分析含氮堿性化合物，如果采用胺分析專用柱進(jìn)行分析，效果更好對不官采用氣相色譜法測的含到刑生化臺物，可滾用其他方法如離子色譜法等測定。

(6)檢測器的選擇 對含鹵素元素的殘留溶劑如三氯甲烷等,采用電子捕獲檢測器(ECD),易得到高的靈敏度

(7)由于不同的實(shí)驗(yàn)室在測定同一供試品時可能采用了不同的實(shí)驗(yàn)方法,當(dāng)測定結(jié)果處于合格與不合格邊緣時,以采用內(nèi)標(biāo)法或標(biāo)準(zhǔn)加入法為準(zhǔn)

(8)頂空平衡溫度一般應(yīng)低于溶解供試品所用溶劑的沸點(diǎn)10℃以下,能滿足檢測靈敏度即可;對于沸,點(diǎn)過高的溶劑，如甲酰胺、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、乙二醇、N,甲基吡咯烷酮等，用頂空進(jìn)樣測定的靈敏度不如直接進(jìn)樣，一般不宜用頂空進(jìn)樣方式測定

(9)利用保留值定性是氣相色譜中最常用的定性方法。色譜系統(tǒng)中載氣的流速、載氣的溫度和杜溫等的變化都會使保留值改變,從而影響定性結(jié)果。校正相對保留時間(RART)只受柱溫和固定相性質(zhì)的影響，以此作為定性分析參數(shù)較可靠。應(yīng)用中通常選用甲烷測定色譜系統(tǒng)的死體積(t):

(10)不同的溶劑在不同的色譜系統(tǒng)中RART值不同，附表2和附表3分別給出了諸殘留溶劑在三種極性不同的色譜系統(tǒng)(非極性色譜系統(tǒng)、中等極性色譜系統(tǒng)和極性色譜系統(tǒng))中的RART值。

來源：藥典委