1.去垂體大鼠體重法

本法系通過比較生長(zhǎng)激毒標(biāo)準(zhǔn)品(S)與供試品(T)對(duì)幼齡去垂體大鼠體重增加的程度，以測(cè)定供試品效價(jià)的一種方法。

標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備 試驗(yàn)當(dāng)日,取標(biāo)準(zhǔn)品,按標(biāo)示效價(jià)用含0.1%牛血清白蛋白的0.9%氨化鈉溶液,制成高、低兩種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。一般高濃度標(biāo)佳品溶液配成每1ml含0.1~0.210，低濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液配成每1m1含0.025-0.051U，高低兩濃度比值(r)一般為1:0.25,標(biāo)準(zhǔn)品溶液分裝成每天劑量并密封于-15℃C以下保存，臨用時(shí)融化。

供試品溶液的制備，按供試品的標(biāo)示效價(jià)或估計(jì)效價(jià)(4-)，照標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備及保存方法制備和保存。測(cè)定法 取同一來源、品系，出生26~28天,體重60~80g,同一性別,健康的大鼠,試驗(yàn)前2~3周手術(shù)摘除垂體,手術(shù)后于屏障環(huán)境飼養(yǎng)使其恢復(fù)。

取去垂體手術(shù)后2~3周、體重變化小于手術(shù)前±10%的大鼠，按體重隨機(jī)等分成4組,每組至少8只,每只編號(hào)并記錄體重。分別自頸部皮下注射一種濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液或供試品溶液0.5ml，每日1次，連續(xù)6日。于最后1次給藥后24小時(shí),處死大鼠，稱體重,必要時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后可進(jìn)行尸檢，切開蝶鞍區(qū)，肉眼檢査有無垂體殘留，剔除有垂體殘存的大鼠。每只動(dòng)物給藥后體重增加的克數(shù)作為反應(yīng)值。供試品與標(biāo)準(zhǔn)品各劑量組所致反應(yīng)的平均值應(yīng)相照生物檢定統(tǒng)計(jì)法(通則1431)中的量反應(yīng)平行線測(cè)定法計(jì)算效價(jià)及實(shí)驗(yàn)誤差，當(dāng)。本法的可信限率(FL%)不得大于50%。

2.去垂體大鼠脛骨法

本法系通過比較生長(zhǎng)激毒標(biāo)準(zhǔn)品(S)與供試品(T)對(duì)去垂體大鼠脛骨骨骺板寬度增加的程度，以測(cè)定供試品效價(jià)的一種方法。標(biāo)準(zhǔn)品溶液和供試品溶液的制備 同體重法。

測(cè)定法 本法可與去垂體大鼠體重法同步進(jìn)行。待體重法實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取下兩腿脛骨，置10%甲醛溶液保存，從脛骨近心端頂部中間沿矢狀面切開置10%甲醛溶液中保存，水洗10分鐘后，置丙酮溶液中10分鐘，水洗3分鐘，置2%硝酸銀溶波中染色2分鐘，水洗后置水中強(qiáng)光照射至變驚黑色，于10%硫代硫酸鈉溶液固定30秒，置80%乙醇溶液中供測(cè)量用。測(cè)量時(shí)沿刨面切1mm左右薄片，蛋顯微鏡下測(cè)量脛骨骨骺板寬度,作為反應(yīng)值。照生物檢定統(tǒng)計(jì)法(通則1431)中的量反應(yīng)平行線測(cè)定法計(jì)算效價(jià)及實(shí)驗(yàn)誤差

本法的可信限率(FL%6)不得大于50%。

來源：藥典委