堿式(小蘇打)泡騰片含量測定根據藥典要求采用高效液相色譜法,其原理是采用高壓輸液泵將規定的流動相泵入裝有填充劑的色譜柱,對供試品進行分離測定的色譜方法。注入的供試品,由流動相帶入色譜柱內,各組分在柱內被分離,并進入檢測器檢測,由積分儀或數據處理系統記錄和處理色譜信號。
堿式(小蘇打)泡騰片藥品成分高效液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、積分儀或數據處理系統組成。色譜柱內徑一般為 2.1~4.6mm,填充劑粒徑約為 2~10μm。超高效液相色譜儀是耐超高壓、小進樣量、低死體積、高靈敏度檢測的高效液相色譜儀。
反相色譜柱:以鍵合非極性基團的載體為填充劑填充而成的色譜柱。常見的載體有硅膠、聚合物復合硅膠和聚合物等;常用的填充劑有十八烷基硅烷鍵合硅膠、辛基硅烷鍵合硅膠和苯基硅烷鍵合硅膠等。
正相色譜柱:用硅膠填充劑,或鍵合極性基團的硅膠填充而成的色譜柱。常見的填充劑有硅膠、氨基鍵合硅膠和氰基鍵合硅膠等。氨基鍵合硅膠和氰基鍵合硅膠也可用作反相色譜。
離子交換色譜柱:用離子交換填充劑填充而成的色譜柱。有陽離子交換色譜柱和陰離子交換色譜柱。
手性分離色譜柱:用手性填充劑填充而成的色譜柱。
色譜柱的內徑與長度,填充劑的形狀、粒徑與粒徑分布、孔徑、表面積、鍵合基團的表面覆蓋度、載體表面基團殘留量,填充的致密與均勻程度等均影響色譜柱的性能,應根據被分離物質的性質來選擇合適的色譜柱。
溫度會影響分離效果,品種正文中未指明色譜柱溫度時系指室溫,應注意室溫變化的影響。為改善分離效果可適當調整色譜柱的溫度。
殘余硅羥基未封閉的硅膠色譜柱,流動相 pH 值一般應在 2~8 之間。烷基硅烷帶有立體側鏈保護、或殘余硅羥基已封閉的硅膠、聚合物復合硅膠或聚合物色譜柱可耐受更廣泛 pH 值的流動相,可用于 pH 值小于 2 或大于 8 的流動相。